产品简介
本产品为10倍浓缩型免冰浴快速转膜缓冲液,是一种安全无害的用于Western Blot时湿转快速转膜的缓冲液,能高效快速地将蛋白转移到印迹膜上;可以使用甲醇或者乙醇,能在15-30 min内完成转膜过程。
安全无毒害:本产品不含有毒有害组分。
转膜缓冲液的转膜效果与传统转膜缓冲液一致或更优。
转膜快速、无需冰浴:使用快速转膜缓冲液时,在400 mA恒流转膜15-30 min即可将聚丙烯酰胺凝胶上的蛋白转移至PVDF膜或硝酸纤维膜(NC膜)等印迹膜上,并且产热较传统转膜缓冲液更低。
| 恒流 | 分子量大小 | 推荐转膜时间 |
| 300 mA | 20 kDa以下 | 20分钟 |
| 20-100 kDa | 30分钟 | |
| 100-150 kDa | 50分钟 | |
| 150 kDa以上 | 60分钟以上 | |
| 400 mA | 20 kDa以下 | 15钟 |
| 20-100 kDa | 25分钟 | |
| 100-150 kDa | 45分钟 | |
| 150 kDa以上 | 55分钟以上 |
操作步骤
1. 取浓缩型免冰浴快速转膜缓冲液100 mL,然后加入600 mL去离子水或蒸馏水或纯水混匀后,继续加入200 mL无水乙醇(也可用同体积甲醇)混匀,最后再加水定容至1 L,混匀后即得到1×工作液;
2. 做好转印所需的三明治结构,从负极(黑色面)到正极(红色面)顺序为海绵、滤纸、凝胶、印迹膜、滤纸、海绵,然后转移至转印槽中,加入免冰浴快速转膜缓冲液,设定恒流400 mA,转膜时间15-30 min(此条件针对1.0 mm厚的凝胶;如凝胶厚度为1.5 mm,适当延长转膜时间)完成蛋白转膜。