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Protein Free Blot Blocking Buffer 10×
10×无蛋白快速封闭液
货号:5310
产品规格:
产品价格:¥400.00

产品简介

       无蛋白快速封闭液是最新一代的即用型、高效快速 Western 封闭液,采用无蛋白配方, 避免抗体与封闭剂的非特异结合,可最大程度地降低背景。同时,封闭时间仅需 5-15min, 简化了 Western 印迹方案。此外,本封闭剂无内源的磷酸化蛋白及生物素,对磷酸化特异抗 体及生物素检测也不会产生干扰。

     【注意】 没有任何一种封闭液能适合所有抗原和抗体检测系统。如出现本试剂不适合的抗体,请 替换使用其它种类的封闭液如 BSA 或脱脂奶粉等。

 

操作步骤

1. 完成转膜后,将膜移入到平皿或者其他适合的容器中。

2. 根据膜的大小,加入适量体积的Blot Blocking Buffer 封闭液,需完全浸没覆盖膜,对于 7.5x 8cm 的膜推荐使用量 5-10ml。

3. 置于水平摇床上,室温条件下振荡孵育 10 分钟。

4. 取出封闭完成的膜,用洗涤液/TBST冲洗蛋白膜 2-3 次,即可用于一抗孵育等后续 western blot 实验。 

保存条件

4℃保存,冰袋运输,至少 1 年有效; 

 

注意事项 

1. 通常用于 PVDF 膜或 NC 膜的封闭时间为 10 分钟。对于背景低的抗体,可以缩短到 5 分钟,而对于一些背景 非常高的抗体,可以尝试将封闭时间延长为 30-60 分钟。

2. 没有任何一种封闭液是适用于所有实验体系的,因此对于一些特殊的实验或抗体,可能需要具体情况考虑使 用其它更合适的封闭液,比如奶粉、BSA 等封闭试剂。 

3. 信号弱或者无信号:有可能是上样量不足;转膜效率低;抗体效价低,特异性差等原因造成,需要根据实验 情况进行调整 

4. 背景高:有可能是抗体使用量过多;蛋白膜洗涤时间不足;抗体和封闭液发生交叉反应;试剂或仪器设备被 污染等原因造成,需要根据实验具体情况进行调整。

5. 本产品仅限于科研使用,实验时请穿实验服并戴一次性手套操作。

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