产品中心

产品介绍

        植物组培抗菌剂（Plant Preservative Mixture, PPM）是一种广谱抗微生物剂，可以杀死细菌和真菌细胞，防止真菌孢子的萌发，并在较高浓度下能消除内源性污染的外植体。研究表明PPM活性成分可以穿透真菌或细菌细胞壁，抑制柠檬酸循环和电子传递链等中心代谢循环中的关键酶的活性，并且可以抑制培养基中的单糖和氨基酸向真菌和细菌细胞的运输。PPM能有效地抑制植物细胞和植物组织培养中的通过空气、水、人传播的微生物污染及内源性污染，而不会影响体外种子发芽、愈伤组织增殖和愈伤组织的再生。

产品特色

与普通的抗生素相比，优势体现在：

1. 是一种广谱、高效抗菌/抗真菌剂。
2. 比常用抗生素价格更低廉，可以作为植物组织培养基的标准成分，并可作为常规使用。
3. 因为它的靶标是抑制多种酶，所以产生抗耐药性的突变体是不可能的。
4. 具有热稳定性，可以和培养基一起灭菌。

应用案例

使用方法

以下所述的操作流程是通用的，可能需要根据待处理的特定物种稍作改动。

1. 含有PPM的培养基可以在超净台外面分装，即无需无菌操作，等琼脂凝固后把盖子盖好。如果用泵来分装培养基，建议在分装前后先用高压灭菌处理的热水清理导管/软管。
2. 如果储存在无菌容器或在此之前储备液未受污染，含PPM的热敏感或热稳定的液体培养基无需经微孔滤膜或高压灭菌处理。但是对于含有200 mg/L或更多氨基酸或蛋白质的富集培养基，建议加入PPM后用滤膜过滤处理。
3. 超净工作台里的器具（镊子或解剖刀）无需在火焰上烧，只要定期地在70%酒精里蘸一下即可。超净工作台无需验证，可以在超净工作台外面的干净台面上操作，不超过一小时即可。
4. PPM溶液呈酸性，pH 3.8，需保存在4℃。低接种密度下推荐工作剂量0.05-0.2%（v/v），可在灭菌前或灭菌后加入培养基，防止通过空气传播污染或内源性污染。处理内源性污染或获得无农杆菌的植物材料需要高剂量的PPM。
5. 对于一些常规情况下表皮上被大量细菌或真菌孢子污染的种子来说，PPM的抗菌效率可能比较弱。对于体外萌发实验，种子应该按照传统的方法先用漂白剂进行表面消毒。因此，在含有PPM的萌发培养基里，在一个非灭菌的容器中种子可以在自来水下冲洗然后在超净台中吹干。如果所使用的器具末端接触到活性细菌、真菌组织或其它怀疑被污染的东西，这些器具应该通过高压或电子加热设备进行灭菌。
6. 一般剂量水平：

除了内源性污染以外，推荐剂量是0.05-0.2%。对于愈伤增殖、器官形成和胚胎形成，推荐的剂量范围是0.05-0.075%。低接种密度或者处理缓慢生长的细菌条件下，在培养基灭菌前或灭菌后加入此剂量的PPM，可防止空气传播的污染和内源性污染。要消除更高密度的内源性污染，需要增加PPM的剂量（参考7-内源性污染）。

7. 内源性污染

1. 对于外植体：以1 cm（或更短）外植体为例，添加4~5% PPM到完全MS基础盐中，但千万不要添加Tween 20和 pH调整剂，搅拌4~12小时之后直接拿出。不用清洗，直接插入含有PPM的培养基里，若是草本植物换至0.05~0.1%PPM的萌发培养基即可；而木本植物则换至0.2% PPM的萌发培养基。